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显微计数法不溶性微粒仪的操作规程

发布时间:2022-02-11   点击次数:580次

显微计数法是将一定体积的供试液滤过,使所含不溶性微粒截留在微孔滤膜上,在100倍显微镜下,用经标定的目镜测微尺分别测定其最长直径在10μm以上(≥10um)和25μm以上(≥25um)的微粒,根据过滤面积上的微粒总数,计算出被检测的供试液每1ml(或每个容器)中含不溶性微粒的数量,这就是显微计数法不溶性微粒仪操作的原理。

1.显微计数法不溶性微粒仪操作的实验环境、仪器和用具

(1) 实验环境 显微计数法不溶性微粒仪的实验操作所处环境应不得引入外来微粒,可以在超净室、层流净化台或能符合要求的洁净实验室中进行。玻璃仪器和其他所需的用品都应洁净。显微计数法所用微粒检查用水(或其他适宜溶剂),使用前须经不大于1.0μm的微孔滤膜滤过。

(2) 显微镜 双筒大视野显微镜,目镜内附标定的测微尺(每格5~10um)。坐标轴前后、左右移动范围均应大于30mm,显微镜装置内附有光线投射角度、光强度均可调节的照明装置。检测时放大100倍。

(3) 镜台测微尺(用于目镜测微尺的标定)。

微孔滤膜 白色,孔径0.45μm、直径25mm(或13mm),一面印有间隔3mm的格栅;膜上如有10μm以上(≥10um)的不溶性微粒,应在5粒以下,并不得有25μm以上(≥25um)的微粒,必要时,可用微粒检查用水冲洗使符合要求。

(4) 直径25mm(或13mm)夹式定量滤器。

(5) 平皿。

(6) 平头无齿镊子。

(7) 计数码器。

2 .显微计数法不溶性微粒仪的操作方法

(1) 供试品检查前的准备

(2) 取50ml微粒检查用水(或其他溶剂),经微孔滤膜(一般孔径为0.45μm)滤过,置于洁净的适宜容器中,旋转使可能存在的微粒均匀,静置待气泡消失。按显微计数法项下的检查法检查,每50ml中含10μm以上(≥10um)的不溶性微粒应在20粒以下,含25μm以上(≥25um)的不溶性微粒应在5粒以下。否则表明微粒检查用水(或其他溶剂)、玻璃仪器和实验环境不适于进行微粒检查,应重新进行处理,检测符合规定后放可进行供试品检查。

(3) 用水冲洗平皿,再用净化水反复冲洗,沥干,置实验环境中备用。

(4) 在净化台上,将滤器用净化水冲洗至洁净,用平头无齿镊子夹取2.4项下符合要求的测定用微孔滤膜置滤器托架上,用滤器夹固定滤器,倒置,反复用净化水冲洗滤器内壁,沥干后安装在抽滤瓶上备用。

(5) 待检样品应事先除去外包装,并用净化水将容器外壁冲洗干净,置适宜实验环境中备用。

(6) 检查法

标示装量为25ml或25ml以上的静脉用注射液或注射用浓溶液 除另有规定外,取供试品,用水将容器外壁洗净,在层流净化台上小心翻转20次,使溶液混合均匀,立即小心开启容器,用适宜的方法

(7) 抽取或量取供试品溶液25ml,沿滤器内壁缓缓注入经预处理的滤器(滤膜直径25mm)中,静置1分钟,缓缓抽滤至滤膜近干,再用微粒检查用水25ml,沿滤器内壁缓缓注入,洗涤并抽滤至滤膜近干,然后用平头无齿镊子将滤膜移置平皿上(必要时,可涂抹极薄层的甘油使滤膜平整),微启盖子使滤膜干燥后,将平皿闭合,置显微镜载物台上。调好入射光,放大100倍进行显微测量,,调节显微镜至滤膜格栅清晰。移动坐标轴,分别检测有效过滤面积上最长粒径在大于10μm(≥10um)和25μm以上(≥25um)的微粒数。另取至少两个供试品,同法测定,计算测定结果的平均值。

(8) 标示装量为25ml以下的静脉用注射液或注射用浓溶液 除另有规定外,取供试品,用水将容器外壁洗净,在层流净化台上小心翻转20次,使混合均匀。,立即小心开启容器,用适宜的方法直接抽取容器中的全部溶液,沿滤器内壁缓缓注入滤器(滤膜直径13mm)中,照上述3.2.1同法测定。

(9) 静脉注射用无菌粉末及供注射用无菌原料药 除另有规定外,照光阻法检查法3.2.3或制备供试品溶液,同3(2)操作测定。

 

显微计数法不溶性微粒仪

 

显微计数法不溶性微粒仪的记录与计算

(1) 记录 显微计数法不溶性微粒仪的记录应包括所用仪器型号;供试品包装情况,检验数量;测定用滤膜处理前后微粒水平,微粒检查用水来源或制备情况与含微粒数。

(2) 计算 用手揿计数码器分别统计滤膜上直径10μm以上(≥10um)的微粒数,以及25μm以上(≥25um)的微粒数,计算,即得每1ml供试品溶液(或每个容器或每份供试品)中所含10μm以上(≥10um)和25μm以上(≥25um)的不溶性微粒数。

4 .显微计数法不溶性微粒仪的注意事项

(1) 各种形状的微粒应以实测到的最长粒径计算,重叠微粒和聚合胶体微粒均以单个微粒计数;结晶析出不属于检测范围,故不应计算。

(2) 必要时另取微粒检查用水(或其他溶剂)25ml照3.2.1项下自“沿滤器内壁缓缓注入,洗涤并抽滤至滤膜近干”起,依法操作,此项空白试验仅可视作对操作环境、实验用具的认证,所得数据不必在供试品检查结果中扣除,但对检测结果的正确与否有密切关系。此项试验必须检测全滤膜,达到3(1)的要求后方可进行样品检测。

(3) 显微计数法不溶性微粒仪检测法不适用于乳液型和混悬型注射剂,对于黏度过高者,光阻法和本法均无法测定时,可用适宜的溶剂经适量稀释后测定。

(4) 供试品的检查数量:为确保检查结果具有统计学意义,除另有规定外,一般应取供试品3瓶(支)以上进行不溶性微粒检查。

5 .显微计数法不溶性微粒仪的结果与判定

(1) 标示装量为100ml或100ml以上的静脉用注射液 除另有规定外,每1ml中含10μm以上(≥10um)的微粒不超过12粒,含25μm以上(≥25um)的微粒不超过2粒,判为符合规定。

(2) 标示装量为100ml以下的静脉用注射液、静脉注射用无菌粉末、注射用浓溶液及供注射用无菌原料 除另有规定外,每个供试品容器中含10μm以上(≥10um)的微粒不超过3000粒,含25μm以上(≥25um)的微粒不超过300粒,判为符合规定。

以上就是梓梦科技编辑部的小编介绍的详细的关于显微计数法不溶性微粒仪检测法的操作教程,如果还有很多朋友在操作中有疑问的欢迎联系梓梦科技。

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